Эффективное восстановление сперматогенеза

Нарушения сперматогенеза и их коррекция у больных с хроническим абактериальным простатитом

А.И. Неймарк, Р.Т. Алиев, Н.А. Ноздрачёв, С. В. Крайниченко,
С.А. Ельчанинова, А.Г. Золовкина, А.В. Поповцева, О.В. Беспалова, Л.А. Ляшенко

Кафедра урологии и нефрологии (зав. кафедрой проф. А. И. Неймарк) Кафедра биохимии (зав. кафедрой проф. С. А. Ельчанинова) Алтайский государственный медицинский университет г. Барнаул

Доля бесплодных браков составляет 15-19%[1?3]. В половине случаев бесплодие в браке обусловлено «мужским фактором».

Частой причиной нарушения фертильности у мужчин является хронический простатит, который вовлекает и другие половые органы, что приводит к нарушению копулятивной и репродуктивной функций.

Однако лишь отдельные работы раскрывают состояние фертильности при хроническом простатите, ограничиваясь при этом общей оценкой, не углубляясь в патогенез [4 — 7]. 

Стандартные методы диагностики не всегда позволяют судить о причинах изменения функций сперматозоидов.

Кроме того, результаты исследований недостаточно надёжны с клинической точки зрения, так как в ряде случаев фертильность бывает не нарушена и при значительных отклонениях спермограммы от нормы, в то время как бесплодие может наблюдаться и у мужчин с нормозооспермией[8,9].

Определенную роль в развитии хронического абактериального простатита у ряда пациентов играют врожденные особенности кровоснабжения.

К ним относится недостаточность артериального кровообращения предстательной железы, обилие анастомозов между венами предстательной железы и венозной системой таза. В совокупности все это отрицательно сказывается не только на течении абактериального простатита, но и на копулятивной и репродуктивной функциях [10-12].

Известно, что регуляция сосудистого тонуса осуществляется с участием активных форм кислорода, и нарушение микроциркуляции может быть отражением дисбаланса в продукции вазоконстрикторов и вазодилататоров.

В настоящее время проводятся многочисленные исследования о влиянии свободнорадикального окисления (СРО) на процессы репродукции[13]. В частности, показано накопление свободных радикалов у мужчин с воспалительными заболеваниями полового тракта и бесплодием.

Роль активных форм кислорода в патогенезе мужского бесплодия в настоящее время мало изучена. Показано, что их избыток может оказывать негативное влияние на половые клетки.

Активные формы кислорода в физиологических концентрациях являются регуляторами сперматогенеза, подвижности сперматозоидов и взаимодействия с яйцеклеткой, однако их избыточное накопление (оксидативный стресс) приводит к повреждению, генетического материала и мембран клетки.

Для защиты от повреждения активными формами кислорода в эякуляте существует мощная антиоксидантная система представленная антиоксидантными ферментами: супероксиддисмутазой, глутатионпероксидазой, каталазой. В ряде работ показано, что в эякуляте фертильных мужчин более высокий резерв антиоксидантной защиты, чем у не фертильных[14-16].

Наличие дисбаланса в продукции свободных радикалов и антиоксидантной защиты приводит к формированию оксидативного стресса, сопровождающегося нарушением микроциркуляции.

Таким образом, можно предположить, что одной из причин хронизации воспалительного процесса в предстательной железе, а так же нарушений копулятивной и репродуктивной функции может быть нарушение микроциркуляции предстательной железы, являющееся следствием дисбаланса антиоксидантной системы. В литературе отсутствуют данные о реабилитации пациентов с данными нарушениями.

Как видно из данных приведенной литературы, проблема реабилитации больных хроническим абактериальным простатитом (ХАП) с нарушением показателей эякулята остаётся актуальной.

Это обстоятельство побудили нас к проведению собственного исследования, целью которого явились изучение состояния антиоксидантной системы эякулята, микроциркуляторных характеристик предстательной железы у больных ХАП и оценка эффективности комплексного лечения с использованием локальной пелоидотерапии.

Материалы и методы. Нами было обследовано 28 мужчин, в возрасте от 20 до 46 лет с ХАП.

В комплекс обследований входили: сбор анамнеза, физикальный осмотр, пальцевое ректальное обследование, микроскопическое исследование секрета простаты, трансректальное ультразвуковое исследование простаты и семенных пузырьков, ультразвуковое исследование органов мошонки, определение гормонов крови (тестостерон, фолликулстимулирующий и лютеинизирующий гормоны), комплексное исследование эякулята, диагностика заболеваний передающихся половым путём, с помощью иммуноферментного анализа и полимеразной цепной реакции.

Контролем служили результаты обследования 11 мужчин с доказанной фертильностью (доноры спермы), которым также был проведён комплекс всех необходимых обследований.

Анализ спермограммы, включающий оценку концентрации, подвижности и морфологии сперматозоидов и оценку физико-химических свойств эякулята проводили методом общеклинического исследования эякулята рекомендованным ВОЗ.

Определяли количество прогрессивно подвижных, слабоподвижных, неподвижных и аномальных (дефекты головки, шейки и средней части, хвоста) сперматозоидов.

Наряду с этим определяли активность антиоксидантных ферментов (супероксиддисмутазы, каталазы и глютатионпероксидазы) с использованием биохимических наборов фирмы «Randox».

Оценку микроциркуляции проводили методом лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) с помощью лазерного анализатора микроциркуляции крови ЛАКК-02. Анатомическое расположение предстательной железы исключает прямое неинвазивное исследование микроциркуляции крови, поэтому мы оценивали микроциркуляцию косвенным методом в проекции простаты.

Накожный зонд, работающий через инфракрасный канал, устанавливали в области промежности между мошонкой и анусом по передней серединной линии. После наложения зонда регистрировали показания в течение 2 минут и оценивали после подсчёта среднестатистического показателя.

Для проведения наглядного сравнительного исследования была выбрана интактная точка, расположенная в области середины гребня подвздошной кости, не имеющей отношения к проекции предстательной железы и других органов с зоной наименьшей микроциркуляции, где устанавливали накожный зонд, работающий через инфракрасный канал.

С целью оптимизации получаемых результатов все измерения проводились в едином тепловом режиме помещения, в одно и тоже время суток у пациента в положении лёжа на спине.

Пациенты с нарушением качественных показателей эякулята были разделены на группы (1-я группа -12 человек, 2-я группа-16. 3-ю, контрольную, группу составили 11 доноров спермы.

Обе группы больных получали стандартную консервативную терапию: аевит по 1 капсуле 3 раза в день в течение 30 дней; комплекс мульти-табс В по 1 драже 3раза в день- 30 дней; вобэнзим по 3 драже 3 раза в день – 30 дней; простакор 5 мг 1 раз в день внутримышечно -10 дней; проста-норм по 1/2 чайной ложки 3раза в день- 60 дней; артезин 2 мг на ночь.

В литературе приводятся данные о возможности возникновения интрапростатического протокового рефлюкса, вызванного турбулентным мочеиспусканием с высоким внутриуретральным давлением[17].

Рефлюкс мочи в протоки и дольки предстательной железы может стимулировать стерильную воспалительную реакцию.

Данные литературы свидетельствуют, что a1-адреноблокаторы могут препятствовать возникновению данного рефлекса, именно поэтому в комплекс лечения нами был включён препарат артезин.

Во 2-ой группе дополнительно к стандартному лечению проводился курс локальной пелоидотерапии с использованием лечебно-профилактической серебросодержащей глины «Бехтемирская».

Пелоидотерапия- лечебный метод, основанный на применении грязей (пелоидов). Пелоиды (греч. Pelos — ил, грязь + -eides — подобный) – осадки различных водоёмов, торфяные отложения болот, извержения грязевых вулканов и другие природные образования [18].

В состав глины «Бехтемирская» входят преимущественно алюмосиликаты, состоящие из кремния, алюминия, воды и примесей катионов калия, магния, натрия, кальция.

Кроме того, в состав глины входят в микроколичествах многие другие элементы, а так же органические вещества[19].

Глина обладает мощной адсорбционной способностью.

Это её качество оказывает активное и очень ценное терапевтическое действие- глина способна поглощать из окружающей среды различные ионы с одновременным выделением соответствующего количества других ионов, а так же активизировать кровообращение, ускорять обменные процессы, повышать иммунные свойства, усиливать электролитный обмен [19].

Лечебную глину очищали, нагревали на водяной бане до сметанообразной массы (38-400) и медленно вводили в прямую кишку при помощи специального шприца. После этого больного укладывали на живот и укутывали простыней. Грязевой тампон оставлялся в прямой кишке до акта дефикации (20-60 мин). Процедуру проводили 4 раза в неделю, на курс 8 процедур.

Эффективность лечения оценивалась через 14дней от начала лечения (1-2 дня после последнего сеанса пелоидотерапии) и через 3 месяца (2.5 месяца после последнего сеанса пелоидотерапии). Оценивали показатели эякулята, полученного после 4-дневного полового воздержания, активность антиоксидантной системы и показатели микроциркуляции предстательной железы.

Полученные данные обрабативали с помощью статистической программы (общая статистика по группам, сравнение групп с помощью критерия Манна-Уитни).
Результаты. При исследовании эякулята получены следующие данные (рис 1).

Достоверных различий таких показателей, как объём спермы, концентрация сперматозоидов, количество лейкоцитов, количество клеток сперматогенеза, в обеих группах до лечения, через 14 дней и через 3 месяца после лечения не выявлено, показатели близки к результатам контрольной группы.

Количество живых, активноподвижных и нормальных форм сперматозоидов в обеих группах до лечения достоверно снижено. В контрольной группе живых сперматозоидов было 92,6±2,3%, активно подвижных- 78,6±3,2%, нормальных форм сперматозоидов- 87,6±3,1%, в 1-ой группе до лечения — 67,1±1,3, 37,5±3,1 и 72,1±3,1% соответственно, во 2-ой группе — 69,2±0,8, 32,5±1,8 и 76,5±4,0% (см. рис.1).

Достоверных изменений показателей эякулята в обеих группах через 14 дней от начала лечения не выявлено. Через 3 месяца от начала терапии количество живых сперматозоидов во второй группе возросло(86,2±1,5%) и отличалось от 1-ой группы (75,1±3,4%).

Количество активно подвижных сперматозоидов во 2-ой группе возросло (73,3±2,3%) за счёт уменьшения количества малоподвижных и неподвижных форм сперматозоидов, превышало их число в 1-ой группе (58,3±3,2%) и достигло контрольных величин (78,6±3,2%) (см. рис.1).

Количество нормальных форм сперматозоидов как в 1-ой (72,3±3,1%), так и во 2-ой (75,5±3,1%) группах достоверно не изменилось (р0,05). Во 2-й группе активность антиоксидантных ферментов возросла достоверно больше, чем в 1-й группе: супероксиддисмутаза — 277,3±25,1 ед/л, глутатионредуктаза — 461,7±43,7 ед/л, каталаза — 13,8±1,2 ед/л (см. рис.2); уровень МДА повысился- 4,1±0,4 мкмоль/л.

Через три мес от начала лечения достоверных изменений содержания антиоксидантных ферментов, по сравнению с данными, полученными через 14 дней от начала лечения, не отмечено (р>0,05). Уровень МДА в 1-й группе составил 2,9±0,4 мкмоль/л, во 2-й-2,6±0,3 мкмоль/л.

Выявленные особенности кровотока в проекции предстательной железы (по вышеописанной методике) у пациентов контрольной группы были квалифицированы как физиологическая форма периферической гемодинамики: показатель микроциркуляции в пределах средних значений, пульсовые колебания среднеамплитудные, медленные колебания обычной амплитуды преобладают в структуре колебаний капиллярного кровотока, вазомоторная активность не снижена.

Читайте также:  Зачем мужчинам делают обрезание крайней плоти?

При регистрации показателей базального кровотока в интактной точке у здоровых мужчин были получены следующие результаты: средний поток крови 7,08±0,31 перф.ед., среднее квадратическое отклонение 0,79±0,16 перф. ед., коэффициент вариации 12,06±1,12%.
До лечения у пациентов 1-ой и 2-ой групп, получены следующие данные (см. табл.1).

При исследовании микроциркуляции на фоне проведения курса стандартной терапии у пациентов 1-ой группы выявлено усиление тканевой перфузии, но не достигшее контрольных значений как через 14 дней, так и через 3 мес от начала лечения (р>0,05).

После лечения отмечалось повышение показателя активного механизма регуляции в предстательной железе и преобладание его над пассивным механизмом, однако он не достигал показателей контрольной группы. Установлено также уменьшение внутрисосудистого сопротивления в предстательной железе.

Значимых изменений нейрогенного тонуса, миогенного тонуса, индекса эффективности микроциркуляции, показателя шунтирования в проекции предстательной железе не отмечалось (р0.05 Показатели микроциркуляции у пациентов группы получавшей стандартную терапию и группы получавшей локальную пелоидотерапию через 14 дней от начала лечения (Х±m). Табл.

2 Показатель Контрольная группа (n=11) I группа через14дней от начала лечения(n=12) II группа через 14 дней от начала лечения(n=16) P2-3 P2-4 P3-4 1 2 3 4 5 6 7 Средний поток крови, пф. ед. 11,51±0,34 8,09±1,11 11,33±1,07 * ** * Среднее квадратичное отклонение, пф. ед.

3,62±0,07 3,05±0,06 3,54±0,05 * ** * Коэффициент вариации, % 30,52±0,20 26,08±0,23 30,63±0,25 * ** * Миогенный тонус, отн. ед. 0,76±0,03 0,90±0,03 0,78±0,03 * ** * Нейрогенный тонус, отн. ед. 0,75±0,03 0,67±0,02 0,69±0,02 * ** ** Показатель шунтирования, у. е. 1,05 ±0,03 1,20±0,04 1,07±0,04 * ** * Индекс эффективности микроциркуляции, у. е. 1,10±0,05 0,98±0,01 1,07±0,03 * ** * (*)- P< 0.05

(**)-P>0.05

Обсуждение. Как видно из полученных результатов, исходные показатели активности антиоксидантных ферментов в обеих группах не имеет достоверных различий и достоверно ниже, чем в контрольной группе. Данные изменения могут свидетельствовать об угнетении антиоксидантной защиты.

Высокий уровень МДА в обеих группах больных в сравнении с контрольной свидетельствует о повреждающем действии свободных радикалов.

Полученные через 14 дней от начала лечения данные свидетельствуют, что в обеих группах произошла активация антиоксидантной системы, в частности достоверно возрос уровень супероксиддисмутазы и каталазы, причём во 2-й группе их значения приблизились к значениям контрольной группы.

Уровень МДА возрос во 2-й группе достоверно больше, чем в 1-й. Это может быль расценено как активация свободнорадикального окисления в ответ на физиотерапевтическое воздействие.

Через три мес от начала лечения достоверных изменений по сравнению с данными, полученными через 14 дней от начала лечения, в содержании антиоксидантных ферментов не отмечено.

Уровень МДА снизился в обеих группах и приблизился к значению контрольной группы, что свидетельствует о компенсации транзиторной продукции свободных радикалов возросшей активностью антиоксидантных ферментов.

При исследовании базального кровотока и микрососудистого тонуса в проекции предстательной железы в обеих группах до лечения наблюдалось снижение тканевой перфузии, модуляций кровотока и коэффициента вариации, а также снижение нейрогенного тонуса, повышение показателя шунтирования, миогенного тонуса и умеренное снижение индекса эффективности микроциркуляции по сравнению с группой здоровых мужчин (см. табл.1).

Изменениям базального кровотока сопутствовали изменения микроциркуляции в проекции предстательной железы, такие как снижение амплитуды пульсовых и медленных колебаний, повышение амплитуды быстрых колебаний, значительное повышение показателя активного механизма микроциркуляции и снижение показателей пассивного механизма регуляции, рост внутрисосудистого тонуса.

Показатели базального тонуса в интактной точке у пациентов с ХАП достоверно не отличались от полученных в группе здоровых мужчин (р>0,05). Выявленные особенности микроциркуляции в предстательной железе при ХАП указывают на статическую форму кровотока: снижение тканевой перфузии, пульсовые колебания и медленные колебания низкоамплитудные, повышение вазомоторной активности [20].

Через 14 дней показатели микроциркуляции у пациентов группы получавшей стандартную терапию и группы получавшей локальную пелоидотерапию, изменились (табл.2).

На фоне проводимой терапии у пациентов 2-й группы в точке проекции предтательной железы отмечалось достоверное повышение тканевой перфузии, повышение модуляции кровотока, снижение миогенного тонуса, незначительное увеличение нейрогенного тонуса, снижение показателя шунтирования, увеличение индекса эффективности микроциркуляции (р>0,05). Данные изменения расценены как ослабление спастических симптомов, уменьшение отека простаты, сброса крови по коллатералям и депонирования крови в сосудах микроциркулятрного русла. Внутрисосудистое сопротивление снизилось во всех колебательных ритмах.

Данные изменения отмечаются уже на 14-й день от начала лечения и достоверно не отличаются от показателей, полученных через 3 мес от начала лечения. Данные, полученные при регистрации ЛДФ-сигнала с интактной точки, у пациентов всех групп не изменились, причём, как до, так и после лечения (р>0,05).

При исследовании микроциркуляции методом ЛДФ на фоне проведения курса стандартной терапии у пациентов 1-й группы получено усиление тканевой перфузии, но не достигшее контрольных значений как через 14 дней, так и через 3 мес от начала лечения (р>0,05).

После лечения отмечалось повышение показателя активного механизма регуляции в предстательной железе и преобладание его над пассивным механизмом, однако он не достиг показателя контрольной группы. Установлено уменьшение внутрисосудистого сопротивления в предстательной железе.

Значимых изменений нейрогенного тонуса, миогенного тонуса, индекса эффективности микроциркуляции, показателя шунтирования в точке предстательной железы не выявлено (р

Источник: http://www.menclinic.ru/science/narushenia-spermatogeneza

Мужское бесплодие в XXI веке – реалии и перспективы. Новые возможности использования комбинированной стимулирующей терапии гонадотропинами

Актуальность проблемы мужского бесплодия

По данным статистических исследований в США, в настоящее время 10–15% супружеских пар страдают бесплодием. Не последнюю роль в этом играет поздний возраст планирования первой беременности и обусловленное этим снижение фертильности женщины.

Однако в XXI веке все больше внимания уделяется мужскому бесплодию, которое даже при выявлении, как правило, не лечат.

Пара отправляется в клинику, специализирующуюся на экстракорпоральном оплодотворении (ЭКО), где чаще всего ей предлагается самый простой вариант лечения мужского бесплодия – использование спермы донора, в результате чего увеличивается процент мужчин, воспитывающих генетически чужих детей.

Несмотря на большие успехи вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), результативность ЭКО, оцениваемая по количеству живорожденных детей, за последние 10 лет практически не изменилась и составляет не более 30%, что стали связывать с отсутствием лечения мужского бесплодия и подготовки мужчин к ВРТ.

Учитывая спад рождаемости и прогрессирование мужского бесплодия, крайне важно пересмотреть подходы не только к диагностике, но и лечению мужского бесплодия, в том числе его тяжелых форм, неадекватная терапия которых нередко заканчивается несколькими неудачными попытками ЭКО и применением в конечном итоге спермы донора.

Мужское бесплодие: классификация, причины, подходы к лечению

Выделяют три типа мужского бесплодия: обструктивное, подлежащее хирургическому лечению (38%), эякуляторное (2%) и необструктивное, связанное с нарушением сперматогенеза (60%).

К основным причинам, приводящим к необструктивному бесплодию, относятся гипогонадотропный гипогонадизм, генетические аномалии, варикоцеле, крипторхизм, травмы, опухоли, перекрут яичка, перенесенный орхит, воздействие лекарственных препаратов и гонадотоксинов.

Гипогонадотропный гипогонадизм встречается в рамках синдрома Каллмана, гемохроматоза, синдрома Барде – Бидля, синдрома Прадера – Вилли, семейной церебральной атаксии, гиперпролактинемии, при опухолях гипофиза и гипоталамуса, туберкулезе, грибковых инфекциях, при применении опиатов и психотропных средств, при ожирении, хронических соматических заболеваниях, после хирургических вмешательств на головном мозге или лучевой терапии [1].

Различают несколько типов изменений в спермограмме: снижение общего количества сперматозоидов – олигозооспермия, нарушение их подвижности – астенозооспермия, изменение морфологии сперматозоидов – тератозооспермия. Однако чаще всего в клинической практике встречается коморбидная патология – олигоастенотератозооспермия (ОАТ), которая признана самой частой причиной мужского бесплодия [2].

Выявление и устранение причин мужского бесплодия может дать возможность многим парам восстановить фертильность и не прибегать к ВРТ. Несмотря на все возможности диагностики, в 25% случаев мы не можем выявить причину изменений в спермограмме; такие случаи относят к идиопатическому бесплодию и назначают неспецифическое лечение.

Спектр схем эмпирической терапии достаточно широк, но ни одна из них не показала эффективности в рандомизированных исследованиях. К наиболее распространенным вариантам эмпирической терапии относят назначение антиэстрогенов, витаминов-антиоксидантов, ингибиторов ароматазы, L-карнитина, цинка.

Любая терапия должна продолжаться не менее 3–6 месяцев, так как полный цикл сперматогенеза занимает 72 дня [3]. Поскольку лечение длительно, а эффективность его недостаточно высока, многие пары предпочитают воспользоваться ЭКО.

Для бесплодных пар с неудовлетворительными показателями спермограммы супруга или имевшим неудачные попытки ЭКО сегодня предлагается интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИКСИ).

Морфологические характеристики сперматозоидов считаются основным фактором, позволяющим предсказать исход внутриматочной инсеминации или ЭКО. Однако доля сперматозоидов с нормальной морфологией в нативной сперме или даже после отделения фракции с наибольшей подвижностью не влияет на исход ИКСИ [4].

Высказано предположение, что использование сперматозоида с «невидимыми повреждениями» может привести к неудаче попытки ИКСИ, нарушению эмбрионального развития, низкой вероятности наступления беременности. Таким повреждением считается нарушение целостности ДНК сперматозоида – фрагментация [5].

Влияние нарушения целостности ДНК сперматозоидов на исходы ИКСИ изучалось с использованием различных методик. При этом были получены противоречивые результаты. Одни авторы выявили четкую отрицательную взаимосвязь между долей сперматозоидов с фрагментированным ДНК и их оплодотворяющей способностью в цикле ИКСИ.

Читайте также:  Что такое тератозооспермия и как это лечить разными методами?

Другие исследователи не обнаружили такую зависимость, но отметили низкую вероятность наступления беременности после переноса эмбрионов [6, 7]. Такие двойственные результаты можно объяснить тем, что фрагментация ДНК во всех этих исследованиях изучалась в общем пуле сперматозоидов (как морфологически нормальных, так и измененных).

Для ИКСИ всегда отбирается только морфологически нормальный сперматозоид. Оказалось, что даже в таких хорошо подвижных и морфологически нормальных при обычной микроскопии сперматозоидах может быть фрагментированная ДНК.

Этот факт крайне важен, поскольку даже у субфертильных пациентов с пограничными и нормальными показателями спермограммы фрагментация ДНК определялась в 25% случаев [8]. При этом ни у кого из фертильных мужчин группы контроля в морфологически нормальных сперматозоидах фрагментация ДНК не выявлена.

Длительное время подготовке мужчин к процедуре ЭКО и ИКСИ не уделялось достаточно внимания, и, возможно, улучшение качества сперматозоидов позволит не только повысить результативность ВРТ, но и в ряде случаев получить естественную беременность, что мы нередко наблюдаем в результате подготовки мужчины к ВРТ.

Цикл развития зародышевых клеток сперматогенного эпителия

В последнее десятилетие сделаны ключевые открытия в понимании сложного процесса регуляции развития сперматогенных клеток. Раскрытие основных механизмов действия гормонов на зародышевые клетки сперматогенного эпителия дает ключ к лечению мужского бесплодия.

Большая часть данных получена при изучении приматов, и, хотя их нельзя полностью экстраполировать на человека, однозначно существует межвидовая общность в регуляции основных биологических процессов [9]. Так, в середине 1970-х гг. в исследованиях на приматах была определена важнейшая роль тестостерона для сперматогенеза.

В последнее десятилетие определена не менее важная роль фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), хотя ранее однозначного мнения о его необходимости в постнатальном периоде не было.

Для лучшего понимания предложенных нами терапевтических подходов необходимо рассмотреть схему развития зародышевых клеток сперматогенного эпителия, находящуюся под контролем ФСГ и тестостерона.

Зародышевые клетки проходят последовательно митотическое и мейотическое деление, в процессе которых происходит дупликация, репарация и сегрегация ДНК в 4-фазном клеточном цикле.

Во время клеточного цикла сперматогонии растут в фазе G1, синтезируют ДНК в фазе S, подготавливаются к митозу в фазе G2 и проходят митоз и мейоз в М-фазе (состоит из 4 подфаз: профаза, метафаза, анафаза и телофаза). В своем развитии сперматоциты проходят 2 мейотических деления.

В профазе 1, метафазе 1 и телофазе 1 первого мейотического деления сперматоциты последовательно превращаются в лептотеновые, зиготеновые и пахитеновые сперматоциты, а затем в диплотеновые клетки. Во время 2-го мейотического деления синтез ДНК не происходит, и в результате деления диплотеновых клеток образуется 4 гаплоидных зародышевых клетки, что знаменует окончание М-фазы [10].

В конце клеточного цикла у клетки есть два дальнейших пути развития: она может вступить в новый клеточный цикл или перейти в фазу покоя (G0). Например, клетки Сертоли в препубертате остаются в фазе G0. Клетка может находиться в фазе покоя неопределенно долгое время, прежде чем возобновит пролиферацию.

Клеточный цикл может прерваться как на ключевых этапах развития (G1 и G2), так и в любую фазу клеточного цикла.

Для прохождения нормального клеточного цикла необходимо присутствие определенных внешних ростовых факторов, в отсутствие которых клетка переходит в фазу G0. При создании благоприятных условий клетка может возобновить клеточный цикл [11].

Недостаток или длительное отсутствие этих факторов препятствует переходу клетки в следующую фазу и запускает механизмы апоптоза, приводящие к ее гибели [12].

Гормональная регуляция сперматогенеза

Процесс сперматогенеза запускается и регулируется гормонами гипоталамо-гипофизарно-гонадной оси. Гонадотропин-рилизинг-гормон (ГНРГ) выделяется в пульсирующем ритме и воздействует на гипофиз, стимулируя секрецию лютеинизирующего гормона (ЛГ) и ФСГ.

Фолликулостимулирующий гормон воздействует на клетки Сертоли, лютеинизирующий – на клетки Лейдига. На зародышевых клетках рецепторы к тестостерону не обнаруживаются, и андрогены, секретируемые клетками Лейдига, действуют через рецепторы на клетках Сертоли.

Тестостерон, образующийся в клетках Лейдига, ингибин клеток Сертоли и эстрогены, получившиеся в результате ароматизации тестостерона, действуют на гипоталамус, регулируют секрецию гонадотропинов по механизму отрицательной обратной связи.

У человека развитие сперматогоний, мейоз и процесс отделения сперматид от клеток Сертоли (спермиация) контролируются ФСГ и тестостероном [13].

Для сперматогенеза необходимы функциональные и соединительнотканные взаимосвязи между клетками Сертоли и клетками зародышевого эпителия.

Сами зародышевые клетки не имеют рецепторов к гормонам, и эти субстанции оказывают свое биологическое действие на сперматогенез, связываясь с рецепторами, расположенными внутри или на поверхности клеток Сертоли.

Для процесса спермиации необходимо наличие определенной популяции клеток Сертоли, которая формируется к пубертатному возрасту (11–13 лет) [14]. Численность популяции клеток Сертоли определяется в раннем постнатальном периоде и является важнейшей составляющей сперматогенеза во взрослом состоянии.

При старте сперматогенеза клетки Сертоли проходят стадию пролиферации, и многочисленными исследованиями in vivo и in vitro показано, что ФСГ является основным регулятором этого процесса.

Известно, что популяция клеток Сертоли у взрослого мужчины неизменна и не зависит от колебаний уровня гормонов после пубертата.

Тем не менее при изучении мужчин с гипогонадотропным гипогонадизмом выяснилось, что клетки Сертоли сохраняют пролиферативную активность и могут приобретать черты, свойственные незрелым клеткам Сертоли [15].

Численность зародышевых клеток определяется балансом между их апоптозом и делением. В препубертате проходит ранняя волна апоптоза сперматогоний (обусловливающая гибель 70% сперматогоний), которая необходима для формирования правильного соотношения между клетками Сертоли и зародышевыми клетками [16].

Ранее предполагалось, что количество зародышевых клеток находится под контролем клеток Сертоли, однако при пересадке зародышевых клеток крысы в яичко бесплодного самца мыши оказалось, что зародышевые клетки сами, в отсутствие клеток Сертоли, осуществляют выбор времени и этапность протекания сперматогенеза [16].

Тестостерон вырабатывается в клетках Лейдига под действием ЛГ и оказывает биологическое действие на сперматогенез через андрогеновые рецепторы, расположенные на клетках Сертоли [17].

ФСГ оказывает свое действие через G-ассоциированные рецепторы к ФСГ, находящиеся на мембране клеток Сертоли.

Взаимодействие ФСГ с рецептором клетки Сертоли активирует по меньшей мере 5 сигнальных путей, таких как циклический аденозинмонофосфат и протеинкиназа, МАР-киназа, кальций, фосфатидилинозитол-3-киназа и фосфорилаза А2 [18].

Под влиянием ФСГ в клетках Сертоли повышается активность ароматазы, способствующей конверсии андрогенов в эстрогены, а также вырабатываются ингибин и активин. Ингибин является важной составляющей обратной связи в регуляции секреции ФСГ.

При изолированном поражении клеток Сертоли, возникающем после радио- или химиотерапии, дефицит ингибина сопровождается значительным повышением ФСГ, в то время как уровень ЛГ остается в пределах нормальных значений.

ФСГ регулирует также количество андрогеновых рецепторов и андроген-связывающего глобулина, что крайне важно для регуляции сперматогенеза [19]. ФСГ необходим для поддержания высокой локальной концентрации андрогенов в семенных канальцах [20].

Блокада рецепторов к ФСГ у взрослых макак-резус приводит к бесплодию. Бионейтрализация циркулирующего человеческого ФСГ снижала качество и количество сперматозоидов [21].

В течение всего периода сперматогенеза гаметы получают питание от клеток Сертоли, которые располагаются в пространстве от базальной мембраны до просвета семенного канальца. Клетки Сертоли секретируют необходимые электролиты и жидкость под действием ФСГ и тестостерона.

Во взрослом состоянии ФСГ необходим для прогрессии прелептотеновых сперматоцитов и частично – пахитеновых. Острый дефицит ФСГ приводит к снижению количества прелептотеновых сперматоцитов даже в присутствии нормального уровня андрогенов.

ФСГ принимает участие в спермиогенезе, вероятно, регулируя степень адгезии между клетками Сертоли и сперматидами [22]. Показано, что после нейтрализации ФСГ прекращается выделение спермы, что свидетельствует о роли ФСГ в спермиогенезе [23].

Тестостерон частично обеспечивает созревание сперматоцитов, тем не менее он играет важнейшую роль в превращении округлых сперматид в удлиняющиеся.

При культивации семенных канальцев человека в средах, лишенных ФСГ, отмечено существенное усиление фрагментации ДНК в первичных сперматоцитах и удлиняющихся/удлиненных сперматидах, что связывают с активацией апоптоза [24]. Острый дефицит ФСГ на животных моделях запускает процесс апоптоза сперматогоний [25].

Сегодня доказано, что ФСГ и тестостерон действуют как антиапоптотические факторы, регулируя каскад реакций, приводящий к активации генов апоптоза, в значительно меньшей степени эти гормоны регулируют пролиферацию. ФСГ способствует устранению апоптотических изменений в структуре сперматозоидов, вызванных микробной инфекцией, и повышает оплодотворяющий потенциал сперматозоидов [26].

Гормональная терапия мужского бесплодия

Нарушение тонкого гормонального баланса является одной из причин мужского бесплодия, поэтому именно стимулирующая гормональная терапия может рассматриваться как патогенетический подход к лечению. Она может применяться in vivo для достижения естественного оплодотворения или повышения результативности процедуры ЭКО, а также in vitro для повышения оплодотворяющей способности сперматозоидов.

ЛГ и ФСГ относятся к гипофизарным гонадотропинам, третьим гонадотропином является хорионический гонадотропин (ХГЧ), секретируемый плацентой. ХГЧ близок по структуре к ЛГ и взаимодействует с тем же рецептором на клетках Лейдига. Поскольку гонадотропины играют ключевую роль в инициации сперматогенеза, их пытаются применять для лечения различных форм мужского бесплодия.

ХГЧ получают из мочи беременных женщин и используют для восполнения дефицита ЛГ и повышения содержания внутритестикулярного тестостерона. Менопаузальный гонадотропин получают из мочи женщин в постменопаузе, он обладает одновременно ЛГ- и ФСГ-активностью. Существуют также очищенный мочевой и рекомбинантный ФСГ [27].

До недавнего времени полагали, что повышения интратестикулярной концентрации тестостерона при помощи препаратов хорионического гонадотропина достаточно для того, чтобы качественно восстановить сперматогенез у взрослых. Оказалось, что такой подход не всегда дает ожидаемый результат.

При длительном дефиците как ФСГ, так и тестостерона введение только ФСГ не восстанавливает полный цикл сперматогенеза, хотя и несколько повышает количество сперматогоний и влияет на все зародышевые клетки до стадии пахитеновых сперматоцитов.

Тем не менее даже при наличии незначительного (ниже нормы) уровня тестостерона происходит восстановление сперматогоний, то есть для осуществления ФСГ своей функции необходимо присутствие хотя бы небольшого количества тестостерона.

Давно известна эффективность терапии препаратами ФСГ при гипогонадотропном гипогонадизме и изолированном дефиците ФСГ.

При этих состояниях терапия ФСГ или ФСГ совместно с ЛГ позволяет получить нормальную спермограмму даже при исходной азооспермии [28].

Лечение пациентов с олигоастенотератозооспермией препаратами ЛГ и ФСГ повышает вероятность наступления беременности в цикле ЭКО и ИКСИ на 47,2%, при этом параметры спермограммы на фоне терапии практически не меняются [29].

В нашей практике мы используем следующие схемы применения стимулирующей терапии при лечении гипогонадотропного гипогонадизма, а также подготовки мужчин к ВРТ: препараты ХГЧ (Хорагон) в дозе 1500 ЕД 2–3 раза в неделю или в дозе 5000 ЕД 1 раз в неделю в течение 2–3 месяцев с последующим присоединением препаратов ФСГ (Менопур) – 75–150 ЕД 3 раза в неделю. Продолжительность лечения составляет от 3 до 12–18 месяцев. У большинства пациентов такая терапия позволяет достичь наступления спонтанной беременности или повышает результативность ВРТ.

Читайте также:  Что такое послеродовая депрессия, как она проявляется у мужчин?

Источник: http://umedp.ru/articles/muzhskoe_besplodie_v_xxi_veke_realii_i_perspektivy_novye_vozmozhnosti_ispolzovaniya_kombinirovannoy.html

Средство для улучшения и/или восстановления репродуктивной функции

Изобретение относится к области медицины и фармакологии и касается средства для улучшения и/или восстановления репродуктивной функции, представляющего собой α-кристаллическую форму 9-фенил-симм-октагидроселеноксантена формулы 1 с порошковой рентгенограммой, полученной на Сu-К источнике излучения с показателями характеристического отражения, выраженными в градусах угла дифракции 2θ: 6,0; 12,0; 15,0; 17,0; 19,0; 20,0; 21,5; 21,7; 20,9; 25,0; 27,0; 28,0; 29,0; 37,0 и температурой плавления 96,8°С. Технический результат — снижение токсичности и соответственно повышение допустимых доз. 3 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к ондрологии, и может быть использовано для лечения млекопитающих с нарушенной фертильностью.

Бесплодие представляет серьезную медицинскую и социально-экономическую проблему как в нашей стране, так и за рубежом. В настоящее время бесплодием страдает по разным оценкам от 15 до 25% семейных пар, и эта цифра имеет тенденцию к увеличению.

Примерно 40% случаев отсутствие беременности в браке связывают с мужским бесплодием, столько же с женским и примерно 20% случаев является следствием бесплодия двух сторон. Причины мужского бесплодия, приводящие к нарушению нормального хода сперматогенеза и нарушению секреции половых гормонов могут быть самые разнообразные.

В зависимости от патологического процесса, приводящего к развитию патоспермии, для лечения мужского бесплодия используют хирургические и медикаментозные методы.

Реабилитация репродуктивного здоровья мужчин с нарушенной фертильностью с помощью имеющихся медикаментозных средств представляет серьезные трудности в связи с отсутствием лекарственных препаратов, стабильно и качественно стимулирующих и восстанавливающих сперматогенез.

Как правило, приходится применять комплекс препаратов — антибактериальных, противовоспалительных и гормональных, приостанавливающих патологический процесс, приводящий к дистрофическим изменениям в семенных канальцах и межуточной ткани яичек.

При этом приходится полагаться на то, что после ликвидации патологического процесса с восстановлением сперматогенеза справится сам организм мужчины. Однако это происходит далеко не всегда.

Помимо инфекционных агентов и эндогенных факторов в последние десятилетия особое значение приобрела проблема экзогенных интоксикаций в связи с накоплением в окружающей среде большого количества химических веществ, отрицательно влияющих на половые органы мужчины. Отрицательное влияние оказывает на сперматогенный (зародышевый) эпителий яичек также бесконтрольное применение лекарственных препаратов: сульфаниламидов, антибиотиков, цитостатиков и других.

Перечисленные экзогенные факторы, а также ряд профессиональных интоксикаций приводит к выраженному оксидативному стрессу. Установлено, что примерно у 40% бесплодных мужчин в половых органах происходит накопление свободных радикалов, которые могут привести к поражению весьма чувствительного герминативного эпителия яичек.

Связь селена с возникновением нарушений воспроизводительной функции животных отмечена достаточно давно, и этой проблематике посвящено значительное количество исследований.

При недостатке селена в рационе у животных возникают множественные метаболические изменения, напоминающие авитаминоз Е: задержка роста, дегенеративные и дистрофические изменения в скелетной мускулатуре и миокарде, нервных клетках, печени, почках, легких и других органах.

Происходят нарушения воспроизводительной функции у животных и птицы различных видов обоего пола: нарушение овариального цикла, повышенная эмбриональная смертность, высокий процент бесплодия, снижение либидо, уменьшение количества и ухудшение качества спермы.

Дефицит селена вызывает разрыв сперматозоида по середине хвоста, где обнаружен селенопептид, который играет важную роль в формировании хвоста, а также является структурным протеином митохондрий и энзимов тела сперматозоидов и компонентом плазмы семени.

Известно средство для лечения расстройств половой функции у мужчин /RU 2163806, A61K 31/475, 2001/, которое содержит йохимбина гидрохлорид, корень женьшеня, натрия селенит, цинка окись и кислоту аскорбиновую.

Известно применение аминокислотного хелата цинка, селена и пурегона совместно с физиопроцедурами для улучшения качества спермы при патоспермии /RU 2205047, A61N 5/067, 2001/.

Известно также применение пролонгированной формы селенопирана в масле (пролонгированная форма) одновременно с витаминоми Е, Д и А для улучшения репродуктивной функции быков /RU 2249450, A61K 31/00, 2005/.

Во всех приведенных средствах используется либо селен, либо его химические соединения. Известна токсичность селена и его химических соединений, что препятствует использованию его в достаточных для достижения результата дозах.

Задачей предлагаемого изобретения является создание средства, которое обладало бы одновременно антиоксидантными свойствами, защищало бы органы, генерирующие половые клетки от вредного воздействия окружающей среды и одновременно восстанавливало (стимулировало) пролиферацию и дифференцировку половых клеток.

Техническим результатом изобретения является снижение токсичности и соответственно повышение допустимых доз.

Для решения поставленной задачи и для достижения заявляемого технического результата предлагается средство для улучшения и/или восстановления репродуктивной функции, представляющее собой α-кристаллическую форму 9-фенил-симм-октагидроселеноксантена структурной формулы

с порошковой рентгенограммой, полученной на Cu-К источнике излучения, с показателями характеристического отражения, выраженными в градусах угла дифракции 2θ: 6,0; 12,0; 15,0; 17,0; 19,0; 20,0; 21,5; 21,7; 20,9; 25,0; 27,0; 28,0; 29,0; 37,0 и температурой плавления 96,8°C.

Наличие в составе предлагаемого средства селена дает возможность препарату активизировать ферментативную защиту организма от радикальных и перекисных соединений в репродуктивной системе.

Кроме этого, сама молекула вещества также обладает антирадикальными свойствами и способствует повышению иммунитета к различным видам заболеваний, а также повышает активность факторов неспецифической резистентности организма.

Влияние заявляемого средства на репродуктивную функцию крыс

Изучение репродуктивной функции крыс под влиянием заявляемого средства проводили на самках, разделенных на 2 группы по 12 крыс. У самок микроскопически определяли одну из фаз течки — эструс. Затем к отобранным самцам подсаживали самок. На следующий день у самок исследовали взятый из влагалища мазок. День обнаружения спермиев в мазке у крыс считали первым днем беременности.

Заявляемое средство вводили внутрь в дозе — 1 мг/кг массы тела, опытной группе с 1 по 13-й день беременности (период, включающий две фазы развития, наиболее чувствительные к воздействиям), контрольная группа получала стандартный рацион. Результаты опытов по изучению репродуктивной функции крыс представлены в табл.1.

Таблица 1
опытные
Показатели контроль с 1 по 13 день беременности
Число самок 12 12
Число на 1 самку:
желтых тел 11,59±1,61 11,49±1,54
мест имплантации 9,65±1,87 11,41±1,72
мест резорбций 0,52±0,69 0,27±0,50
плодов 9,32±1,93 12,05±1,67
Масса плодов, г 23,06±3,8б 26,46±3,25
Масса плаценты, г 6,72±1,10 6,87±0,93
Погибших яйцеклеток 0,54±0,26 0,32±0,27
Общая эмбриональная смертность, % 16,7 10,5
Предымплантационная гибель, % 9,0 5,7
Постимплантационная гибель, % 9,4 6,2

На основании данных, приведенных в таблице, можно сделать вывод, что селексен стимулирует репродуктивную функцию крыс по сравнению с контрольной группой животных.

Об этом свидетельствует разница у животных двух групп в количестве желтых тел, мест имплантации, мест резорбции, количества плодов, погибших яйцеклеток, масса плодов, общей эмбриональной смертности, пред- и постимплантационной гибели плодов.

Способность предлагаемого средства восстанавливать сперматогенез можно продемонстрировать следующими примерами.

Пример 1

С.Д. 28 лет

Диагноз: основной — смешанное бесплодие, сопутствующий — атрофия левого яичка

Анамнез заболевания: нет зачатия в течение 3-х лет.

Перенесенные заболевания:

1. Варикоцеле — операция Иванисевича — слева

2. Через 3-4 месяца — паховое грыжесечение слева, осложненное острым орхоэпидидимитом, фуникулитом, впоследствии сформировалась атрофия левого яичка.

В спермограмме: олигоастенотератозооспермия (см. таблицу).

Получал консервативное лечение: спеман, аевит, жень-шень.

После лечения в спермограмме олигоастенотератозооспермия — без улучшения.

Далее стал получать заявляемое средство внутрь по 1 мг 2 раза в день в течение 3-х месяцев.

Результаты приведены в таблице 2.

Таблица 2
Количество в мл Живых Нормальных Дегенеративных Нормальная подвижность
До лечения Единичные 0% 100%
Через 2 недели после начала 0,6 млн 50% 70% 30% 12%
Через 5 недель после начала 1 млн 90% 95% 5% 5%
Через 3 месяца* 5,2 млн 55% 74% 26% 10%
*результат после курса гормональной терапии

Прогноз для зачатия с помощью экстракорпоральных методов оплодотворения благоприятный.

Пример 2

Я.А. 27 лет

Диагноз: основной — секреторное бесплодие, сопутствующий — варикоцеле, хронический простатит.

Перенесенные заболевания: Варикоцеле — не оперирован. Хронический простатит.

Получал лечение: адаптогены, аевит, спеман.

Результат в спермограмме: астенозооспермия (см. таблицу 3).

Далее стал получать заявляемое средство внутрь по 1 мг 2 раза в день в течение 3-х месяцев.

Таблица 3
Количество в мл Живых Нормальных Нормальная подвижность
До лечения 10,5 млн 60% 65% 10%
Через 2 недели после начала 18,5 млн 75% 57% 81%
Через 2 месяца** после начала 16,5 млн* 60% 58% 80%
После 3-х месяцев — спермограмма не получена
* увеличилось общее количество спермы (мл)
** в процессе лечения перенес обострения хр. простатита — пролечен

Средство для улучшения и/или восстановления репродуктивной функции, представляющее собой α-кристаллическую форму 9-фенил-симм-октагидроселеноксантена структурной формулы

с порошковой рентгенограммой, полученной на Сu-К источнике излучения, с показателями характеристического отражения, выраженными в градусах угла дифракции 2θ: 6,0; 12,0; 15,0; 17,0; 19,0; 20,0; 21,5; 21,7; 20,9; 25,0; 27,0; 28,0; 29,0; 37,0 и температурой плавления 96,8°С.

Источник: http://www.FindPatent.ru/patent/241/2414215.html

__________________________________________
Ссылка на основную публикацию